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常用的滅菌方法

滅菌法系指用適當的物理或化學手段將物品中活的微生物殺滅或除去的方法。

(一)物理滅菌法　利用蛋白質與核酸具有遇熱和對射線不穩定的特性，采用加熱、輻射或過濾的方法，殺滅或除去微生物的技術，稱為物理滅菌法。

1.干熱滅菌法系指利用火焰或干熱空氣達到殺滅微生物或破壞熱原物質的方法。加熱可以破壞蛋白質與核酸中的氫鍵，導致蛋白質變性或凝固，核酸破壞，酶失去活性，使微生物死亡。干燥狀態下，熱穿透力差，微生物的耐熱性強，需長時間高熱才能達到滅菌的目的。藥典規定：干熱滅菌條件一般為(160～170)oC×120min以上、(170～180)℃×60min以上或250℃×45min以上，也可采用其他溫度和時間參數。250℃×45min的干熱滅菌也可除去無菌產品包裝容器及有關生產灌裝用具中的熱原物質。本法適用于耐高溫但不宜用濕熱滅菌法滅菌的物品滅菌，如玻璃器皿、纖維制品、金屬材質容器、固體藥品、凡士林、液體石蠟等。

2.濕熱滅菌法系指用飽和水蒸氣、沸水或流通蒸汽等進行滅菌的方法。由于蒸汽潛熱大，穿透力強，容易使微生物變性凝固，滅菌效率比干熱法高。

(1)熱壓滅菌法：系指將物品置于在熱壓滅菌柜內，利用高壓飽和水蒸氣滅菌、過熱水噴淋等手段殺滅微生物的方法。本法滅菌能力強，為熱力滅菌中最有效、應用最廣泛的滅菌方法。藥品、容器、培養基、無菌衣、膠塞以及其他遇高溫和潮濕不發生變化和損壞的物品均可采用本法滅菌。藥典規定：濕熱滅菌條件通常采用126℃(3×15min、121℃×30rain或116℃×40rain的程序。標準滅菌時間F0值一般不低于8min。

使用熱壓滅菌柜應注意的問題：①使用前應檢查壓力表、溫度表、安全閥等儀表;②首先開啟放氣活門將柜內空氣排盡;③先預熱，再升壓，升溫，達到預定壓力和溫度后開始計時;④滅菌完畢后，待壓力表指針降至0后，打開放氣閥，排盡柜內蒸汽，待溫度降至40℃以下，再緩緩開啟門蓋，驟然減壓會導致容器爆裂和藥液外溢。

(2)流通蒸汽滅菌法和煮沸滅菌法：系指在常壓下用水蒸氣或沸水滅菌的方法。～般為l00℃，30—60min，可殺滅繁殖型細菌，但不一定能完全殺滅細菌孢子。一般可作為不耐熱無菌產品的輔助滅菌手段。

(3)低溫間歇滅菌法：系指將待滅菌的物品先在60～80℃加熱60min以殺死細菌繁殖體，然后室溫保溫24h，待細菌孢子發育成繁殖體，再同法操作2—3次，直至完全殺滅細菌孢子為止。此法適于必須采用加熱滅菌但又不耐較高溫度的產品。

3.過濾除菌法 系指利用細菌不能通過致密具孔濾材的原理以除去氣體或液體中微生物的方法。通常用于熱不穩定的藥品溶液或原料的除菌。常用的除菌微孔濾膜孔徑一般不超過0.22μm。過濾器不得對被濾過的成分有吸附作用，也不能釋放物質，不得有纖維脫落，禁用含石棉的過濾器。濾器與濾膜在使用前應進行潔凈處理，并用高壓蒸汽進行滅菌或做在線滅菌。更換品種和批次應先清洗濾器，再更換濾膜。通過過濾除菌達到無菌的產品應嚴密監控其生產環境的潔凈度，應在無菌環境下進行過濾操作。

4.紫外線滅菌法 系指利用紫外線照射殺滅微生物的方法。波長254nm的紫外線殺菌力最強，可使微生物核酸蛋白變性死亡，同時空氣受紫外線輻射后產生的微量臭氧也起滅菌作用。由于紫外線穿透能力很差，所以紫外線滅菌法僅適于表面和空氣的滅菌。

5.砷60C0-γ射線輻射滅菌法系指利60C0-^y射線殺滅微生物的方法。γ射線可使有機化合物分子直接發生電離，破壞正常代謝的自由基，導致微生物體內大分子化合物分解而被殺滅。其特點是穿透力強，滅菌過程中，被滅菌物品溫度的變化d"0醫療器械、容器、生產輔助用品、不受輻射破壞的原料藥及成品等均可用本法滅菌;尤其適用于已包裝藥品的滅菌。輻射劑量的制定，事先應驗證所使用劑量不影響被滅菌物品的安全性、有效性及穩定性。常用的輻射滅菌吸收劑量為25kGy。對最終產品、原料藥、某些醫療器材應盡可能采用低輻射劑量滅菌。

6.微波滅菌法 系指利用微波照射殺滅微生物的方法。微波是指頻率在300MHz到300kMHz之間的電磁波。水和極性分子可強烈地吸收微波，使其分子運動和相互摩擦迅速升溫。微生物因體內蛋白質同時受熱和極性轉動兩方面的作用，空間結構變化或破壞而變性死亡。微波能穿透到介質的深部，通常可使介質加熱表里一致。適用于水性藥液的滅菌，也適用于藥材飲片及固體制劑的滅菌。

(二)化學滅菌法

化學滅菌法系指用化學藥品殺滅微生物的方法。其殺菌機制可能是：作用于微生物核酸蛋白，使其變性、與微生物酶系統結合影響代謝或改變膜壁通透性致微生物死亡等。氣體滅菌法是常用的化學滅菌法。

氣體滅菌法系指利用化學藥品形成的氣體殺滅微生物的方法。常用的化學藥品有環氧乙烷、氣態過氧化氫、甲醛、臭氧等。采用氣體滅菌法時應注意滅菌氣體的可燃可爆性、致畸和殘留毒性。

本法常用的氣體是環氧乙烷，一般與80%一90%的惰性氣體混合使用，在充有滅菌氣體的高壓腔室內進行。環氧乙烷分子易穿透塑料、紙板和固體粉末，可用于塑料包裝的原料粉末、散劑、顆粒等固體藥料及其他不能采用高溫滅菌的物品滅菌。含氯物品以及能吸附環氧乙烷的物品不宜采用本法滅菌。

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（責任編輯：中大編輯）

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