熱力學水活度(thermodynamic water activity, αw)是指在特定溫度和壓力條件下，有機溶劑反應(yīng)體系中酶的活性與水含量的關(guān)系的―種描述。αw是反應(yīng)體系巾水的摩爾分數(shù)χw與水活度系數(shù)γw的乘積，唪αw =γwχw。γw是溶劑疏水性的函數(shù)，溶劑疏水性越大，γw越大。在平衡狀態(tài)時，反應(yīng)體系中各組分(酶、溶劑、底物和產(chǎn)物等)的αw是相同的。酶活性與反應(yīng)體系的熱力學水活度直接相關(guān)，例如米赫毛霉脂肪酶(Mucor miehei lipase)在水活度為0．55時，在不同極性的溶劑中都表現(xiàn)出最高的酶活性，其中在正己烷溶劑中活性最強，有機溶劑中過多的水或過少的水都會影響酶活性。Valivety等對不同來源的5種脂肪酶進行了研究，發(fā)現(xiàn)酶的催化活性與水活度相關(guān)，但是不同酶在相同有機溶劑中的最佳水活度值不同，這可能是由于酶分子結(jié)構(gòu)的差異性所造成的。

水活度或水含量的增加會導致酶催化反應(yīng)中某種底物rm值的增加，例如在二嚅烷溶劑中，聚乙二醇修飾的枯草桿菌蛋白酶(PEG-subtilisin)催化丁酸乙烯酯3與正己醇4酯交換生成丁酸已酯5。由于在酯化反應(yīng)中，水是一種抑制劑，它與底物競爭酰基-酶中間體，促進逆反應(yīng)。因此，在有機溶劑反應(yīng)體系中，親核性試劑的rm會隨水含量的增加而增加，例如枯草桿菌蛋白酶(subtilisin)對正己醇的表觀Km(即Km．唧)隨水濃度增加而增加，而酰化試劑丁酸乙烯酯的Km不受溶劑的影響(表5-2)。因此，水活度(珥y)值將影響水解酶催化酯化或轉(zhuǎn)酯反應(yīng)的平衡。

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