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藥物成分分離透析法
透析法是利用小分子物質(zhì)在溶液中可通過半透膜,而大分子物質(zhì)不能通過半透膜的性質(zhì),達(dá)到分離的方法。
例如分離和純化皂甙、蛋白質(zhì)、多肽、多糖等物質(zhì)時,可用透析法以除去無機(jī)鹽、單糖、雙糖等雜質(zhì)。反之也可將大分子的雜質(zhì)留在半透膜內(nèi),而將小分子的物質(zhì)通過半透膜進(jìn)入膜外溶液中,而加以分離精制:透析是否成功與透析膜的規(guī)格關(guān)系極大。
透析膜的膜孔有大有小,要根據(jù)欲分離成分的具體情況而選擇。
透析膜有動物性膜、火棉膠膜、羊皮紙膜(硫酸紙膜)、蛋白質(zhì)膠膜、玻璃紙膜等。由常多用市售的玻璃紙或動物性半透膜扎成袋狀,外面用尼龍網(wǎng)袋加以保護(hù),小心加入欲透析的樣品溶液,懸掛在清水容器中。經(jīng)常更換清水使透析膜內(nèi)外溶液的濃度差加大,必要時適當(dāng)加熱,并加以攪拌,以利透析速度加快。為了加快透析速度,還可應(yīng)用電透析法,即在半在半透膜旁邊純?nèi)軇﹥啥朔胖枚€電極,接通電路,則透析膜中的帶有正電荷的成分如無機(jī)陽離子、生物堿等向陰極移動,而帶負(fù)電共荷的成分如無機(jī)陰離子、有機(jī)酸等則向陽極移動,中性化合物及高分子化合物則留在透析膜中。透析是否完全,須取透析膜內(nèi)溶液進(jìn)行定性反應(yīng)檢查。
一般透析膜可以自制:動物半透膜如豬、牛的膀胱膜、用水洗凈,再以乙醚脫脂,即可供用;羊皮紙膜可將濾紙浸入50%的硫酸15~60分鐘,取出鋪在板上,以水沖洗制得。其膜孔大小與硫酸濃度、浸泡時間以及用水沖洗速度有關(guān);火棉膠膜系將火棉膠溶于乙醚及無水乙醇,涂在板上,干后放置水中即可供用,其膜孔大小與溶劑種類、溶劑揮發(fā)速度有關(guān),溶劑中加入適量水可使膜孔增大,加入少量醋酸可使膜孔縮小;蛋白質(zhì)膠(明膠)膜可用20%明膠涂于細(xì)布上,陰干后放水中,再加甲醛使膜凝固,沖洗干凈即可供用。近來商品有透析膜管成品出售,國外習(xí)稱“ViskingDialysisTubing”,有各種大小厚度規(guī)格,可供不同大小分子量的多糖、多肽透析時選用。
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